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SEM掃描電鏡樣品的處理過程的介紹

日期:2023-02-16 09:38:12 瀏覽次數(shù):140

主要包括表面清潔、固定、漂洗和脫水等過程,基本上與透射電鏡樣品的處理方法相似,但也有其特殊之處。

1. 樣品大小 所切取樣品比透射電鏡樣品稍大一些,為8~10mm2,高約5mm。

2. 清潔表面 清潔表面并充分暴露樣品表面。常用清洗液有蒸餾水、生理鹽水、緩沖液及含酶的清洗液等。

3. 固定和脫水 常用的固定方法是戊二醛-四氧化餓雙重固定,也可用戊二醛單固定法。

掃描電鏡.jpg

常用脫水劑是乙醇或丙酮。脫水劑濃度梯度增加,從30%或50%開始至百分之BAI進(jìn)行脫水;易變形樣品脫水劑濃度梯度宜緩慢遞增。

4. 樣品的干燥 脫水后,需要將樣品中的脫水劑徹底揮發(fā)干凈,即樣品干燥。其方法有:空氣干燥 、真空干燥、冷凍干燥和臨界點(diǎn)干燥。

5. 樣品表面導(dǎo)電處理 用金屬鍍膜法和組織導(dǎo)電處理技術(shù),一是可增強(qiáng)導(dǎo)電能力,消除荷電效應(yīng);二是增加樣品表面二次電子發(fā)射率,加強(qiáng)訊號,提高圖像反差。

①金屬鍍膜:使樣品表面覆蓋薄層金屬膜,這層薄膜與樣品表面的凹凸形態(tài)完全一致,使標(biāo)本表面的形貌得以反映。常用的金屬有金、鉑、鉬、或金/鉑、鉑/銫合金。鍍膜的方法有真空鍍膜法和離子濺射法。

②組織導(dǎo)電技術(shù):其目的是為提高導(dǎo)電率克服生物材料的荷電效應(yīng),提高樣品表面二次電子發(fā)射率。組織導(dǎo)電處理也稱導(dǎo)電染色,是利用某些金屬鹽類能與生物材料中的蛋白質(zhì)、脂類和淀粉等結(jié)合,使樣品表面離子化,使組織導(dǎo)電性增加;并且提高二次電子的發(fā)射率??捎么姿徕?、碘化鉀、丹寧酸等處理標(biāo)本。

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