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掃描電鏡樣本三個干燥方法以及優(yōu)缺點的介紹

日期:2023-06-07 09:15:14 瀏覽次數(shù):112

掃描電鏡觀察樣品要求在高真空中進行。無論是水或脫水溶液,在高真空中都會產(chǎn)生劇烈地汽化,不僅影響真空度、污染樣品,還會破壞樣品的微細結(jié)構(gòu)。因此,樣品在用電鏡觀察之前要進行干燥。

來介紹三種干燥方法主要有:空氣干燥法、臨界點干燥法、冰凍干燥 。

掃描電鏡.jpg

一、空氣干燥法

基本描述:將經(jīng)過脫水的樣品,讓其暴露在空氣中使脫水劑逐漸揮發(fā)干燥 ,也可直接(不脫水)放在干燥器中干燥。

常用方法

方法1:單固定或雙固定→脫水→樣品置于100%的脫水劑中→在空氣中自然干燥;

方法2:固定→(組織導電處理)→浸泡在緩沖液與乙醚的1:1中5min→空氣干燥;

方法3:單固定或雙固定→乙醇脫水→浸沒于六甲基二硅胺烷HMDS中二次每次15min→通風廚干燥1h

二、臨界點干燥法(CPD: critical point dryer)

1.基本含義:臨界點干燥法是利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)時,其表面張力等于零的特性,使樣品的液體完全汽化,并以氣體方式排掉,來達到完全干燥的目的。

2.基本概念:臨界點:物質(zhì)的氣態(tài)和液態(tài)兩相之間達到相同密度、成為均Y流體時的溫度和壓力的總稱。此時的溫度稱為臨界點溫度,壓力稱為臨 界點壓力。

3.中間劑:把用來置換脫水劑而后又被干燥劑所置換的液體。

4.常用干燥劑

co2,F(xiàn)-13,F(xiàn)-23,F(xiàn)-116,N2O

5.常用中間劑:

中間劑:把用來置換脫水劑而后又被干燥劑所置換的液體。

試劑:醋酸(異)戊酯、丙酮

6.干燥過程:固定脫水→轉(zhuǎn)入中間液→移至樣品室→用液體CO2置換醋酸異戊酯 →CO2汽化排氣→干燥

7.臨界點干燥失?。ú粡氐祝┑脑颍?/span>

(1) 脫水不徹底

(2) 醋酸異戊酯反流

(3) 樣表粘有過多醋酸異戊酯

(4) 樣品量過多

(5) 樣品室溫度高,注入CO2困難注入CO2量太少

(6) 樣品室漏氣

三.冰凍干燥

1.基本描述:將經(jīng)過冷凍的樣品置于高真空中,通過升華除去樣品中的水分或脫水劑的過程.

2.含水樣品直接冷凍干燥常規(guī)步驟: 取材→固定→冷凍保護處理→快速冷凍→升華(10-2乇)干燥→裝臺鍍膜

3.樣品脫水后的冷凍干燥基本描述:樣品用乙醇或丙酮脫水后過渡到某些易揮發(fā)的有機溶劑中,然后連同這些溶劑一起冷凍并在真空中升華而達到干燥。

干燥方法優(yōu)缺點:

空氣干燥優(yōu)點: 簡便易行、節(jié)省時間

缺點:由于脫水劑揮發(fā)時表面張力的作用,組織塊會產(chǎn)生收縮變形

臨界點干燥優(yōu)點: 較好地保存樣品的微細結(jié)構(gòu);操作較方便, 快速23小時即可完成,常用

缺點:需要特殊儀器設(shè)備---臨界點干燥儀。

含水樣品直接冷凍干燥優(yōu)點:無需脫水,不會使樣品收縮,較早使用的方法

缺點:花費時間長,消耗液氮多,易產(chǎn)生冰晶損傷,未被廣泛應用.

樣品脫水后冷凍干燥優(yōu)點: 可減少冰晶損傷,且干燥時間短

缺點:有機溶劑對樣品成分有抽提作用,造成部分內(nèi)含物丟失。

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